【用法】

1.材料和设备

1.1    试剂：鲎试剂（本品）、细菌内毒素工作标准品和细菌内毒素检查用水.

1.2    器材

无内毒素吸头或无内毒素移液管、稀释内毒素用玻璃试管。无内毒素10X75mm玻璃反应试管或无内毒素2ml安瓶（规格为0.1ml的不需要）.旋涡混匀仪、移液器、试管架、定时器、恒温水浴或干热恒温仪（37±1℃）-

注意：接触试剂及供试品的所有器皿必须除热原及无干扰因子.耐热器皿可经干热灭菌法（250℃干烤30分钟以上）去 除热原。

2.供试品溶液的准备

供成品的pH值应在6.0 -8.0之间.若超出此范围，需用无内毒素缓冲液或0.1N氢氧化钠、0.1N盐酸调节。若供试品中可能含有导致鲎试剂中G因子旁路反应的（1.3）β-D-葡聚糖，需选用不会对（1.3）β-D-葡聚糖起反应的特异性鲎试剂.

3.操作步骤

3.1细菌内毒素标准溶液及对照液的准备

3.1.1细菌内毒素标准溶液

取细菌内毒素工作标准品1支，按《细菌内毒素工作标准品使用说明书》配制2λ,1λ,0.5λ及0.25λ的一系列内毒素标准溶液（λ为鲎试剂灵敏度标示值）。

3.1.2    阴性对照液：即细菌内毒素检查用水。

3.1.3    阳性对照液：即浓度为2λ的内毒素标准溶液。

3.1.4    供试品阳性对照液：即添加浓度为2λ内毒素标准的供试品溶液.

3.2 鲎试剂的溶解：按标示量加细菌内毒素检查用水于鲎试剂中，轻轻振摇使鲎试剂完全溶解。注意不要引起气泡，溶解后的试剂应在10min内使用（即配即用）.如果鲎试剂的规格大于0.1ml/支，则将溶解后的鲎试剂分装在10X75mm内无内毒素玻璃反应试管或无内毒素安瓶中，成为01ml/管的反应管.

3.3各反应管中分别加入0.1ml阴性对照液，阳性对照液，供试品，或供试品阳性对照液，封闭管口，轻轻摇匀，垂直放入 37℃的恒温器（水浴箱或干热恒温仪）中温育60分钟±2分钟，温育期间避免振动.

3.4 结果判断

3.4.1将试管从恒温器中轻轻取出，缓慢倒转180° .若管内的内容物呈坚实凝胶，不变形，不从管壁滑脱为阳性，记录 为（+ ）；不呈凝胶或虽生成凝胶但不能保持完整并从管壁滑脱为阴性，记录为（一）.

3.4.2只有当阴性对照管结果均为阴性,阳性对照管，供成品阳性对照结果均为阳性，试验方有效，否则无效.若阴性对照管为阳性，提示鲎试剂、细菌内毒素检查用水或实险器具可能受到污染.若阳性对照管为阴性，提示鲎试剂活性减失 、内毒素标用溶液效价降低，鲎试剂的灵敏度或内毒素的效价标示不准确，或内毒素标准溶液的稀释不正确。若供试品 阳性对照管为阴性,提示反应体系内有干扰因素存在