DAPI，UltraPure 超纯级 |4',6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride |cas:28718-90-3|西域试剂

DAPI，UltraPure 超纯级 ,4',6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride ,≥98% (HPLC)

产品编号：SIGMA-D9542| CAS NO：28718-90-3| 分子式：C16H17Cl2N5| 分子量：350.2457

DAPI染色液(DAPI Staining Solution)是一种几乎适用于所有常见细胞和组织细胞核染色的染色液。DAPI可作为DNA特异性探针用于流式细胞仪、染色体染色、组织化学和生物化学中的DNA可视化和定量。

本网站销售的所有产品仅用于工业应用或者科学研究等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或者治疗,非药用,非食用，

货号	价格	库存与货期
SIGMA-D9542	￥1280.00	杭州北京（现货）
SIGMA-D9542	￥752.00	杭州北京（现货）
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产品名称

DAPI，UltraPure 超纯级

英文名称

4',6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride

CAS编号

28718-90-3

产品描述

产品熔点

>300°C (dec.)

产品沸点

545.4ºC at 760mmHg

产品密度

1.41g/cm3

产品闪点

283.6ºC

精确质量

349.086090

PSA

115.53000

LogP

5.60710

外观性状

黄色固体

蒸气压

5.96E-12mmHg at 25°C

溶解性

H2O: 10 mg/mL heat or sonication may be required. Solutions stored in the dark at room temperature or 4 °C should be stable for 2 to 3 weeks.

溶解性数据

In Vitro:

DMSO : 75 mg/mL (214.13 mM; Need ultrasonic)

H₂O : 5.56 mg/mL (15.87 mM; ultrasonic and warming and heat to 60°C)

配制储备液

浓度溶剂体积质量	1 mg	5 mg	10 mg

1 mM	2.8551 mL	14.2755 mL	28.5510 mL
5 mM	0.5710 mL	2.8551 mL	5.7102 mL
10 mM	0.2855 mL	1.4276 mL	2.8551 mL

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。

In Vivo:

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：

——为保证实验结果的可靠性，澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶

1.

请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 40% PEG300 5% Tween-80 45% saline
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (5.94 mM); Clear solution

此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (5.94 mM，饱和度未知) 的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀；然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。
将 0.9 g 氯化钠，完全溶解于 100 mL ddH₂O 中，得到澄清透明的生理盐水溶液
2.

请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 90% (20% SBE-β-CD in saline)
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (5.94 mM); Clear solution

此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (5.94 mM，饱和度未知) 的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中，混合均匀。
将 2 g 磺丁基醚 β-环糊精加入 5 mL 生理盐水中，再用生理盐水定容至 10 mL，完全溶解，澄清透明
3.

请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 90% corn oil
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (5.94 mM); Clear solution

此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (5.94 mM，饱和度未知) 的澄清溶液，此方案不适用于实验周期在半个月以上的实验。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。

*以上所有助溶剂都可在西域网站选购。

体外研究

一般方案
1. DAPI dihydrochloride 工作液的制备
1.1 储备液的制备
将 1 mg DAPI dihydrochloride 溶解于 1 mL ddH₂O 以获得 1 mg/mL 的储备液。
注意：建议将储备液储存在 -20°C 或 -80°C 避光条件下，避免反复冻融。
1.2 DAPI dihydrochloride 工作液的制备
用无血清细胞培养基或 PBS 稀释储备液，得到 1-10 μg/mL的工作液。
注意：请根据需要调整 DAPI dihydrochloride 工作液的浓度
2、细胞染色
2.1 悬浮细胞 (96 孔板)
a．在 4°C 下以 1000 g 离心 3-5 分钟，然后弃去上清液。PBS洗涤2次，每次5分钟。细胞密度为1×10⁶/mL。
b．加入1 mL工作液，室温孵育3-10分钟。
c．4℃、400 g 离心 3-4 分钟，弃上清。
d．用 PBS 洗涤 2 次，每次 5 分钟。
e．用无血清细胞培养基或 PBS 重悬细胞。荧光显微镜或流式细胞术观察。
2.2 贴壁细胞
a．在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
b.从培养基上取下盖玻片并吸出多余的培养基。
c.加入100 μL工作液，轻摇使之完全覆盖细胞，室温孵育 3-10 分钟。
d．用培养基洗涤2次，每次 5 分钟。荧光显微镜或流式细胞仪观察。

保存
-20℃，1年。避光

注意事项 1、请根据实际情况调整 DAPI dihydrochloride 工作液的浓度。
2、本品仅供 R&D 使用，不用于药物、家庭或其他用途。
3. 为了您的安全和健康，请穿白大褂，戴一次性手套操作。

细胞实验

DAPI是一种可对DNA 染色的细胞核染色试剂，它在嵌入双链DNA后释放蓝色荧光。DAPI常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。尽管DAPI不能通过活细胞膜，但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA，microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。

本DAPI溶液用水配制，浓度为1mg/ml。

用于细胞核染色时，推荐的DAPI工作浓度为0.5-10μg/ml。

Protocols for Counterstaining with DAPI:
Immunofluorescence Staining
Note: Cells may be fixed by method of choice, such as with 4% paraformaldehyde. DAPI staining is done after staining for other markers. Fixation and permeabilization of cells is not necessary to counterstain with DAPI.

1. Fix cells using method of choice.
2. Incubate the cells with phosphate buffered saline (PBS) for 15 minutes.
3. Dilute the DAPI solution (we recommend to 300 nM) with PBS. Remove excess PBS from the slide and cover with DAPI solution, making sure the cells are completely covered.
4. Incubate for up to 5 minutes. Rinse the slide several times to remove all free DAPI. It is recommended to use a mounting medium with antifade reagent to reduce fluorescence quenching. The slide is ready to view under the microscope with appropriate filters.

Nuclear Staining for Flow Cytometry
Note: Cells may be fixed with 4% paraformadehyde or absolute ethanol.

1. Fix cells with absolute ethanol or 4% paraformaldehyde.
2. Centrifuge, discard the supernatant, and add 5 ml of PBS, allowing cells to rehydrate for 15 minutes.
3. Dilute the DAPI to 3 µM (recommended) in staining buffer.
4. Centrifuge cell suspension from step 3 above, discard supernatant, and add 1 ml of DAPI solution, then incubate at room temperature for 15 minutes.
5. Analyze by flow cytometry using an instrument with appropriate lasers.

注意事项：

1.DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2.荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3.为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

动物实验

*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。

Concentration / Solvent Volume / Mass	1 mg	5 mg	10 mg
1 mM	2.8551 mL	14.2755 mL	28.551 mL
5 mM	0.571 mL	2.8551 mL	5.7102 mL
10 mM	0.2855 mL	1.4276 mL	2.8551 mL

不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表（参考来源于公开文献）

	小鼠	大鼠	兔	豚鼠	仓鼠	狗
重量 (kg)	0.02	0.15	1.8	0.4	0.08	10
体表面积 (m²)	0.007	0.025	0.15	0.05	0.02	0.5
K_m 系数	3	6	12	8	5	20

动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) ×	动物 B的K_m系数
	动物 A的K_m系数

例如，依据体表面积折算法，将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量，需要将20 mg/kg 乘以小鼠的K_m系数（3），再除以大鼠的K_m系数（6），得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。

稳定性

如果遵照规格使用和储存则不会分解，未有已知危险反应

储存条件

储存条件: -20°C

运输方式: 冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。

化学品安全说明书(MSDS)

下载MSDS

质检证书(COA)

个人防护装备	Eyeshields;Gloves;type N95 (US);type P1 (EN143) respirator filter
危害码 (欧洲)	Xi: Irritant;
风险声明 (欧洲)	R36/37/38
安全声明 (欧洲)	S26-S36-S24/25-S22
危险品运输编码	NONH for all modes of transport
WGK德国	3
RTECS号	NL5995050
海关编码	2933990090

1. 物质的识别

产品名：	DAPI solution
CAS号：	28718-90-3
制造商/供应商：	西域试剂网站：www.hzbp.cn 邮件：13911702513@139.com

2. 合成/成分数据

产品名：	DAPI solution
别名：	4',6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochloride
分子式：	C16H15N5·2HCl
分子量：	350.25

3. 急救措施

吸入后：	如果吸入，移至空气新鲜处，如果呼吸困难，给输氧，如呼吸停止，给予人工呼吸。
皮肤接触后：	用大量的水冲洗，移除污染的衣服和鞋子。
眼睛接触后：	检查并取下隐形眼镜，并用大量的水冲洗；呼叫医生。
吞食后：	如果吞食，用大量纯净水漱口；呼叫医生。

4. 消防措施

适当的灭火剂：	雾状水，二氧化碳，干粉或泡沫。
防护设备：	穿戴自给式呼吸器和防护服，以防止与皮肤和眼睛接触。

5. 泄漏应急处理

安全防范措施：	封锁泄漏区域；穿戴自给式呼吸器，防护服和厚橡胶手套。
清洁/收集措施：	使用液体粘合原料（硅藻土，通用粘合剂）吸取精细粉末；使用酒精擦洗表面和设备除去污渍；根据第11条处理被污染的材料。

6. 处理和储存

安全处理说明：	避免吸入和接触皮肤，眼睛及衣物；材料可能略微具有刺激性。
储存：	粉末型式 -20°C 3年；4°C 2年溶于溶剂 -80°C 6个月；-20°C 1个月

7. 接触控制和个人防护

呼吸设备：	NIOSH / MSHA认可的呼吸器。
双手保护：	耐化学腐蚀的橡胶手套。
眼睛防护：	化学安全护目镜。

8. 稳定性和反应活性

稳定性：	按照说明存储是稳定的；避免强氧化剂。
热分解/其他要避免的情况：	避免光和热。

9. 毒性资料

急性毒性：	无可用资料。
主要刺激性影响：	无可用资料。
在皮肤上：	无可用资料。
对眼睛：	无可用资料；可能具有刺激性。

10. 生态资料

一般注意事项：

无可用资料。

11. 废弃处置

按照所在国家，省份，县市和地方的法规处置。

12. 运输信息

正确的运输名称：	无
非危险品运输：	这种物质被视为非危险品运输。

13. 法规信息

尚未有针对此产品作出的化学安全性评估。

14. 其他信息

[1]. Kapuscinski J, et al. DAPI: a DNA-specific fluorescent probe. Biotech Histochem. 1995 Sep;70(5):220-33.