[[(3,5-二甲基-1H-吡咯-2-基)(3,5-二甲基-2H-吡咯-2-亚基)甲基]甲烷](二氟硼烷) ,[[(3,5-Dimethyl-1H-pyrrol-2-yl)(3,5-dimethyl-2H-pyrrol-2-ylidene)methyl]methane](difluoroborane) ,99% (HPLC)

产品编号:SIGMA-790389| CAS NO:121207-31-6| 分子式:C14H17BF2N2| 分子量:262.11

BODIPY 493/503是一种亲脂性荧光探针,定位在极性脂上,能用于标记细胞中性脂内容物,特别定位在活细胞和固定细胞的脂滴上。BODIPY 493/503与落射荧光显微镜、共聚焦荧光显微镜和双质子荧光显微镜,以及流式细胞仪兼容。最大激发和发射波长分别是493/503nm,适用于活细胞和固定细胞标记。

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SIGMA-790389
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产品名称 [[(3,5-二甲基-1H-吡咯-2-基)(3,5-二甲基-2H-吡咯-2-亚基)甲基]甲烷](二氟硼烷)
英文名称[[(3,5-Dimethyl-1H-pyrrol-2-yl)(3,5-dimethyl-2H-pyrrol-2-ylidene)methyl]methane](difluoroborane)
CAS编号121207-31-6
产品描述BODIPY 493/503是一种亲脂性荧光探针,定位在极性脂上,能用于标记细胞中性脂内容物,特别定位在活细胞和固定细胞的脂滴上。BODIPY 493/503与落射荧光显微镜、共聚焦荧光显微镜和双质子荧光显微镜,以及流式细胞仪兼容。最大激发和发射波长分别是493/503nm,适用于活细胞和固定细胞标记。
产品熔点257 °C
精确质量262.14500
PSA13.32000
LogP2.82650
外观性状固体;Light yellow to Brown powder to crystal
溶解性数据
In Vitro: 

DMSO : ≥ 5 mg/mL (19.08 mM)

* "≥" means soluble, but saturation unknown.

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.8152 mL 19.0760 mL 38.1519 mL
5 mM 0.7630 mL 3.8152 mL 7.6304 mL
10 mM 0.3815 mL 1.9076 mL 3.8152 mL
*

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)。-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。

In Vivo:

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:

——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用; 以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 1.

    请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    90% corn oil

    Solubility: ≥ 0.5 mg/mL (1.91 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 0.5 mg/mL (1.91 mM,饱和度未知) 的澄清溶液,此方案不适用于实验周期在半个月以上的实验。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 5.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中,混合均匀。

*以上所有助溶剂都可在西域网站选购。
体外研究

通用协议
1. BODIPY 493/503工作液的制备
1.1 储备液的制备
取1 mg BODIPY 493/503溶于382 μL DMSO中,得到10 mM储备液。
注意:建议将储备液保存在 -20℃或 -80℃,避光,避免反复冻融。
1.2 BODIPY 493/503工作液的配制
用无血清细胞培养基或PBS稀释储备液,得到1-10 μM工作液。
注意:请根据实际情况调整BODIPY 493/503工作液的浓度。
2。细胞染色
2.1 悬浮细胞 (6孔板)
a.在 4°C 下以 1000 g 离心 3-5 分钟,然后弃去上清液。PBS洗涤2次,每次5 min。细胞密度为1×106/mL。
b.加入1 mL工作液,室温孵育5-30分钟。
c.4℃,400 g离心3-4分钟,弃上清。
d.用PBS洗涤两次,每次5分钟。
e.用无血清细胞培养基或 PBS 重悬细胞。荧光显微镜或流式细胞术观察。
2.2 贴壁细胞
a.在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
b.从培养基上取下盖玻片并吸出多余的培养基。
c.加入100 μL工作液,轻摇使之完全覆盖细胞,室温孵育5-30分钟。
d.用培养基洗涤两次,每次 5 分钟。荧光显微镜或流式细胞术观察。
2.3 组织切片 (石蜡切片)
2.3.1 室温脱蜡水化:二甲苯I 10 min,二甲苯II 8 min,二甲苯III 8 min,无水乙醇5分钟,90%乙醇3分钟,80%乙醇3分钟,70%乙醇3分钟。蒸馏水3分钟*3次,PBS 3分钟*3次。
2.3.2热抗原修复,更换新的切片架,放入水化切片。加入抗原修复液加热煮沸。控制温度在96-98℃。然后将切片放入热锅中 15 分钟,最后在室温下自然冷却。PBS中5分钟*2次,蒸馏水3分钟*2次。
2.3.3免疫组化笔圈:取出组织,抖去水分,用吸水纸吸去水滴。用组织化学笔在组织周围画圈,圈圈保持完整。
2.3.4 灭活内源酶活性:将切片置于盛有少量蒸馏水的湿盒中,滴加3%双氧水,在室温下孵育 10 分钟。PBS 3 分钟*3 次,蒸馏水 3 分钟。
2.3.5 向组织中加入 50-100 μM 染料并孵育 30-60 分钟。
2.3.6 吸出染料工作液用PBS或培养基洗涤2-3次,每次5分钟。
2.3.7荧光显微镜成像观察。
保存
-20° C、1年;避光。
注意事项
1、请根据实际情况调整BODIPY 493/503工作液的浓度。
2、实验提示阳性对照,对照组细胞用30 μM油酸孵育8小时后进行后续实验。
3.本品仅供研发使用,不得用于药物、家用等。
4.为了您的安全和健康,请穿着实验服和一次性手套操作。

细胞实验

储存液的制备和保存 

1)将低温保存的 BODIPY 493/503 置于室温回温约20min,低速离心后加入一定量的无水乙醇或无水DMSO配制成适量浓度的母液,比如5mM(充分溶解即可)。根据单次用量将储存液分装,≤-20℃避光干燥保存。需注意溶液内湿度的逐渐积累会随着时间引起探针聚集,从而务必干燥保存储存液。

2)如需长期保存,可以用无水乙醇溶解粉末,之后分装到小量,使用真空泵来挥发掉乙醇。置于≤-20℃避光干燥保存。

动物实验

*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。

Concentration / Solvent Volume / Mass 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.8152 mL 19.076 mL 38.1519 mL
5 mM 0.763 mL 3.8152 mL 7.6304 mL
10 mM 0.3815 mL 1.9076 mL 3.8152 mL
不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表(参考来源于公开文献
小鼠 大鼠 豚鼠 仓鼠
重量 (kg) 0.02 0.15 1.8 0.4 0.08 10
体表面积 (m2) 0.007 0.025 0.15 0.05 0.02 0.5
Km 系数 3 6 12 8 5 20
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) ×  动物 B的Km系数
动物 A的Km系数

例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。

储存条件避免光

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符号 GHS07
GHS07
信号词 Warning
危害声明 H315-H319-H335
警示性声明 P261-P305 + P351 + P338
危险品运输编码 NONH for all modes of transport
1. 物质的识别
产品名: BODIPY 493/503
CAS号: 121207-31-6
制造商/供应商: 西域试剂
网站:www.hzbp.cn   邮件:13911702513@139.com
2. 合成/成分数据
产品名: BODIPY 493/503
分子式: C14H17BF2N2
分子量: 262.11
3. 急救措施
吸入后: 如果吸入,移至空气新鲜处,如果呼吸困难,给输氧,如呼吸停止,给予人工呼吸。
皮肤接触后: 用大量的水冲洗,移除污染的衣服和鞋子。
眼睛接触后: 检查并取下隐形眼镜,并用大量的水冲洗;呼叫医生。
吞食后: 如果吞食,用大量纯净水漱口;呼叫医生。
4. 消防措施
适当的灭火剂: 雾状水,二氧化碳,干粉或泡沫。
防护设备: 穿戴自给式呼吸器和防护服,以防止与皮肤和眼睛接触。
5. 泄漏应急处理
安全防范措施: 封锁泄漏区域;穿戴自给式呼吸器,防护服和厚橡胶手套。
清洁/收集措施: 使用液体粘合原料(硅藻土,通用粘合剂)吸取精细粉末;
使用酒精擦洗表面和设备除去污渍;
根据第11条处理被污染的材料。
6. 处理和储存
安全处理说明: 避免吸入和接触皮肤,眼睛及衣物;材料可能略微具有刺激性。
储存: -20°C, protect from light, dry, sealed
7. 接触控制和个人防护
呼吸设备: NIOSH / MSHA认可的呼吸器。
双手保护: 耐化学腐蚀的橡胶手套。
眼睛防护: 化学安全护目镜。
8. 稳定性和反应活性
稳定性: 按照说明存储是稳定的;避免强氧化剂。
热分解/其他要避免的情况: 避免光和热。
9. 毒性资料
急性毒性: 无可用资料。
主要刺激性影响: 无可用资料。
在皮肤上: 无可用资料。
对眼睛: 无可用资料;可能具有刺激性。
10. 生态资料
一般注意事项: 无可用资料。
11. 废弃处置
按照所在国家,省份,县市和地方的法规处置。
12. 运输信息
正确的运输名称:
非危险品运输: 这种物质被视为非危险品运输。
13. 法规信息
尚未有针对此产品作出的化学安全性评估。
14. 其他信息
这种化学品仅供受过训练的,有经验的研究人员在穿戴适当装备和授权允许的情况下进行操作处理。以上信息基于我们目前的知识被认为是正确的,但只适用于作为有经验人员的指导。请咨询您自己的安全顾问,并遵守当地和国家的安全法规。在任何其他没有被警告的情况下,并不意味着绝对没有危险存在。西域生物技术不承担任何使用这种化学品所造成的损害和责任。2023 西域生物技术版权所有。





上游产品  3

下游产品  0

BODIPY染色用于流式细胞仪(摘自公开文献,仅供参考)

1. Grow cells under culture conditions relevant for the study. A 35 mm dish/well is sufficient for the cell numbers required in this assay. For our assays, 50,000 A498 cells in 35 mm well were sufficient. Overnight incubation of cells with 30 μM oleic acid can serve as a positive control for increased neutral lipid content, as oleic acid is a potent inducer of triglyceride synthesis and storage. Fatty acid free BSA serves as a control.

2. At the time-point of interest, prepare 2 μM BODIPY staining solution in PBS. The volume of staining solution required for each sample corresponds to the volume of media used for culturing cells.

3. Wash cells with a quick rinse using 3 ml PBS to remove media/serum.

4. Incubate on BODIPY staining solution in the dark for 15 min at 37 °C. Include an unstained control for flow cytometry.

Note: From this point, protect samples from light as much as possible.

5. Wash cells with a quick rinse using 3 ml PBS to remove staining solution.

6. Trypsinize cells to generate a single cell suspension. For the A498 cell line used in this protocol, cells were incubated with Trypsin-EDTA (0.25%) for 5 min at 37 °C.

7. Add 5 ml of PBS and transfer cell suspension to a 15 ml conical tube.

8. Pellet cells at 250 × g, 5 min, 4 °C.

9. Aspirate supernatant, wash the cell pellet with a quick rinse using 3 ml PBS, and pellet cells at 250 × g, 5 min, 4 °C.

10. Carefully aspirate the supernatant and resuspend cells in 300 μl 1× flow cytometry buffer.

11. Pass cell suspension through a 35 μm filter into a FACS tube.

12. Perform flow cytometry. Obtain a minimum of 10,000 events per condition.

13. The investigator can analyze data as mean fluorescence or display the data as a histogram.

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