D-荧光素钾盐 ,D-LUCIFERIN POTASSIUM SALT ,≥98.0% (HPLC)

产品编号:SIGMA-50227| CAS NO:115144-35-9| 分子式:C11H7KN2O3S2| 分子量:318.4132

D-Luciferin potassium salt 是荧光素酶的底物,可催化生物发光昆虫产生典型的黄绿光。

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SIGMA-50227
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SIGMA-50227
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产品名称 D-荧光素钾盐
英文名称D-LUCIFERIN POTASSIUM SALT
CAS编号115144-35-9
产品描述D-Luciferin potassium salt 是荧光素酶的底物,可催化生物发光昆虫产生典型的黄绿光。
PSA136.32000
LogP1.38410
外观性状Solid
溶解性Water 25 mg/mL
溶解性数据
In Vitro: 

H2O : 25 mg/mL (78.52 mM; Need ultrasonic)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.1406 mL 15.7030 mL 31.4060 mL
5 mM 0.6281 mL 3.1406 mL 6.2812 mL
10 mM 0.3141 mL 1.5703 mL 3.1406 mL
*

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。

In Vivo:

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:

——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用; 以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 1.

    请依序添加每种溶剂: PBS

    Solubility: 8.33 mg/mL (26.16 mM); Clear solution; Need ultrasonic and warming and heat to 60°C

*以上所有助溶剂都可在西域网站选购。
体外研究

1. 操作前注意事项
a) D-Luciferin 在 100 mM 的水性缓冲液 (pH 6.1-6.5) 中易于溶解。储备溶液可在不含 ATP 的水中制成,并储存在 -20℃ 的温度下,以防光线照射。游离酸必须用适当的碱中和以溶解。在较高的 pH 值下,荧光素经历碱催化的脱氢脲醛生成,以及外消旋成L-异构体。
b) D-Luciferin 可用于任何现有的报告基因检测或 ATP 检测系统。
c) 如果检测 ATP,需要戴手套和使用不含 ATP 的容器,尽量减少所有可能的 ATP 污染源。只使用无菌的不含 ATP 的水和试剂。所有试剂制剂使用蒸压水。
2. 实验操作
此说明仅提供实验参考,具体实验方法根据您的具体实验进行更改。
2.1 体外成像实验示例
a) 在无菌水中制备100 mM (100-200X) 荧光素储备溶液 拌匀。立即使用或一次性等份使用,并在 -20℃ 下储存,避免冻融循环,避免暴露在阳光下。
b) 在预热过的组织培养液中配制 0.5-1 mM D-Luciferin 工作液
c) 除去细胞中的培养基。
d) 在细胞中加入 D-Luciferin 工作液,成像前 37℃ 孵育细胞 5-10 分钟。
2.2 体内成像实验示例
a) 在 DPBS 中制备 15 mg/mL 荧光素储备溶液,不含 Mg2+ 和 Ca2+ 拌匀。
b) 过滤器通过 0.2μm 过滤器对溶液进行灭菌。立即使用,或一次性等份使用,并在 -20℃ 下储存,避免冻融循环,避免暴露在阳光下。
c) 成像前 10-15 分钟,以 150 mg/kg (或 10 μL/g 荧光素储备溶液) 的动物体重腹腔注射 D-Luciferin。
注:应为每个动物模型进行 D-Luciferin 动力学研究,以确定峰值信号时间。
2.3 基因检测实验示例
a) 在无菌水中制备100 mM 荧光素储备溶液。立即使用,或一次性等份使用,并在 -20℃ 下储存,避免冻融循环,避免暴露在阳光下。
b) 在 25 mM tricine 缓冲液 (pH 7.8) 中制备含有 3 mM ATP、1 mM DTT 和 15 mM MgSO4 的 1 mM D-Luciferin 工作溶液。
c) 用移液管将 5-10 μL 细胞裂解液移到微孔板中。使用不含裂解物的裂解试剂或缓冲液作为空白对照。
d) 根据说明,使用荧光素工作溶液为光度计注入底部。
e) 立即注入 200 μL D-Luciferin工作溶液,结合时间为10秒。

体内研究

使用萤火虫荧光素酶(Fluc)作为报告基因和D-荧光素作为底物的生物发光成像(BLI)是目前使用最广泛的技术。将总信号强度相对于D-荧光素注射后的时间作图,以产生时间 - 强度曲线。除了峰值信号之外,在D-荧光素注射后的固定时间点(5,10,15和20分钟)的信号被确定为峰值信号的替代。给定时间 - 强度曲线中的信号针对曲线中的峰值信号进行归一化,以表示D-荧光素注射后的时间变化模式。

细胞实验

使用方法

1. 体外生物发光检测

1)用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐,配制成15 mg/mL的储存液 (100×) ,混匀后立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。

2)用预热好的组织培养基按1:100将储存液稀释至0.15 mg/mL的工作液浓度。

3)去除细胞培养基。

4)待图像分析前,向细胞内添加荧光素工作液,37℃孵育5-10 min,然后进行图像分析。


2. 活体成像分析

1)用无菌的DPBS (w/o Mg2+、Ca2+) 配制15 mg/mL的荧光素的储存液,混匀。

2)用0.22 µm滤膜过滤除菌。分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。使用时4℃融化,实验前平衡至室温(避光)。

3)腹腔注射(i.p.)或静脉注射(i.v.),按照150 mg/kg的剂量进行注射。

4)注射入体内10-15 min(待光信号达到最强稳定平台期)后进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

动物实验

*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前,需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。

Concentration / Solvent Volume / Mass 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.1406 mL 15.703 mL 31.406 mL
5 mM 0.6281 mL 3.1406 mL 6.2812 mL
10 mM 0.3141 mL 1.5703 mL 3.1406 mL
不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表(参考来源于公开文献)
小鼠 大鼠 兔 豚鼠 仓鼠 狗
重量 (kg) 0.02 0.15 1.8 0.4 0.08 10
体表面积 (m2) 0.007 0.025 0.15 0.05 0.02 0.5
Km 系数 3 6 12 8 5 20
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) ×  动物 B的Km系数
动物 A的Km系数

例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。

稳定性

注意事项

1)注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射,因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线,确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。

2)如果要进行ATP的检测,尽量避免外源ATP的污染,如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材,在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。

3)本品要进行避光操作和保存。储存液过滤除菌后可分装于-20℃或-80℃冻存。

4)在进行D-荧光素钾盐的溶解时,应使用无钙镁离子的DPBS,因钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性,此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响,从而影响检测。

5)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件
储存条件:    -20°C       
运输方式:    冰袋运输,根据产品的不同,可能会有相应调整。

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化学品安全说明书(MSDS)

下载MSDS

质检证书(COA)

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个人防护装备 Eyeshields;Gloves;type N95 (US);type P1 (EN143) respirator filter
危险品运输编码 NONH for all modes of transport
海关编码 2934999090
1. 物质的识别
产品名: D-Luciferin potassium salt
CAS号: 115144-35-9
制造商/供应商: 西域试剂
网站:www.hzbp.cn   邮件:13911702513@139.com
2. 合成/成分数据
产品名: D-Luciferin potassium salt
分子式: C11H7KN2O3S2
分子量: 318.41
3. 急救措施
吸入后: 如果吸入,移至空气新鲜处,如果呼吸困难,给输氧,如呼吸停止,给予人工呼吸。
皮肤接触后: 用大量的水冲洗,移除污染的衣服和鞋子。
眼睛接触后: 检查并取下隐形眼镜,并用大量的水冲洗;呼叫医生。
吞食后: 如果吞食,用大量纯净水漱口;呼叫医生。
4. 消防措施
适当的灭火剂: 雾状水,二氧化碳,干粉或泡沫。
防护设备: 穿戴自给式呼吸器和防护服,以防止与皮肤和眼睛接触。
5. 泄漏应急处理
安全防范措施: 封锁泄漏区域;穿戴自给式呼吸器,防护服和厚橡胶手套。
清洁/收集措施: 使用液体粘合原料(硅藻土,通用粘合剂)吸取精细粉末;
使用酒精擦洗表面和设备除去污渍;
根据第11条处理被污染的材料。
6. 处理和储存
安全处理说明: 避免吸入和接触皮肤,眼睛及衣物;材料可能略微具有刺激性。
储存: -20°C, protect from light, sealed
7. 接触控制和个人防护
呼吸设备: NIOSH / MSHA认可的呼吸器。
双手保护: 耐化学腐蚀的橡胶手套。
眼睛防护: 化学安全护目镜。
8. 稳定性和反应活性
稳定性: 按照说明存储是稳定的;避免强氧化剂。
热分解/其他要避免的情况: 避免光和热。
9. 毒性资料
急性毒性: 无可用资料。
主要刺激性影响: 无可用资料。
在皮肤上: 无可用资料。
对眼睛: 无可用资料;可能具有刺激性。
10. 生态资料
一般注意事项: 无可用资料。
11. 废弃处置
按照所在国家,省份,县市和地方的法规处置。
12. 运输信息
正确的运输名称: 无
非危险品运输: 这种物质被视为非危险品运输。
13. 法规信息
尚未有针对此产品作出的化学安全性评估。
14. 其他信息
这种化学品仅供受过训练的,有经验的研究人员在穿戴适当装备和授权允许的情况下进行操作处理。以上信息基于我们目前的知识被认为是正确的,但只适用于作为有经验人员的指导。请咨询您自己的安全顾问,并遵守当地和国家的安全法规。在任何其他没有被警告的情况下,并不意味着绝对没有危险存在。西域生物技术不承担任何使用这种化学品所造成的损害和责任。2023 西域生物技术版权所有。





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