葡聚糖凝胶 Sephadex LH-20,Sephadex LH-20

产品编号:Sigma-LH20100| CAS NO:Null| MDL NO:Null,without related properties.| 分子式:Null,without related properties.| 分子量:Null,without related properties.

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Sigma-LH20100
1750.00 杭州 北京(现货)
Sigma-LH20100
5700.00 杭州 北京(现货)
Sigma-LH20100
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产品性状

Sephadex LH20是一种价钱较高的填料,特点: 1、适合用有机溶剂分离嗜脂性分子,可以非常经济地大规模制备各种天然产物 2、结合凝胶过滤、分配色谱及吸附性层析于一身,分离结构非常相近的分子 3、载量可高达300mg样品/ml凝胶,极少需要再生,分离效果可保持十几年不变。

质量标准

Sephadex LH20 的原理
Sephadex LH20的分离原理主要有两方面:以凝胶过滤作用为主,兼具反相分配的作用(在反相溶剂中)。因为凝胶过滤作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脱下来,小分子的化合物保留强,最后出柱。如果使用反相溶剂洗脱, Sephadex LH20对化合物还起反相分配的作用,所以极性大的化合物保留弱,先被洗脱下来,极性小的化合物保留强,后出柱。如果使用正相溶剂洗脱,这主要靠凝胶过滤作用来分离。
Sephadex LH20 洗脱溶剂
Sephadex LH20 洗脱溶剂因分为两类:反相和正相两种。用得最多的是反相溶剂洗脱,以甲醇--水系统最为常见,先用水,逐渐增加甲醇比例,最后用100%甲醇冲柱。正相系统以氯仿--甲醇最为常见,先用50%氯仿--甲醇,逐渐增加甲醇比例,最后用100%甲醇冲柱。
样品的处理和洗脱溶剂的选择
如果样品极性大,这选用反相溶剂洗脱(甲醇--水),样品用最少体积的甲醇--水(尽可能甲醇少一些)溶解,过滤后,湿法上样(一定要滤喔!要是把Sephadex LH20 堵啦,就得将Sephadex LH20 的柱头部分弃去,很心痛呀)。如果样品极性小,这选用正相溶剂洗脱(氯仿--甲醇),样品用最少体积的氯仿--甲醇溶解,过滤后,湿法上样。
分离的技巧
(1) 流速不可太快,切切不可新急,所谓欲速则不达。
(2)柱子尽可能长, Sephadex LH20 柱长的增加将极大地改善分离,所不要吝惜填料,宁可将填料全装在一根大柱子中,不要将填料装成几根小柱。所谓集中优势兵力,打击敌人。
(3) 馏分一定要接的细,可1/10,或1/20 个保留体积接成一馏分。
(4) 洗脱体积一般为2-3个保留体积,对特殊保留强的化合物,可洗脱5个保留体积。
(5)鞣质成分死吸附严重,如不在乎填料者,可用Sephadex LH20 分鞣质
(6)Sephadex LH20 对黄酮类成分的分离效果极佳,方法很成型,有大量文献参考。
(7)填料反复使用,每次用完,一般可用甲醇将柱子洗干净,然后用下一次分离的起步溶剂将甲醇替换出来,待用。

相关文档

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