5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯(CFDA)|5(6)-Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester(CFDA),≥90% (HPLC)|cas:150347-59-4|西域试剂

5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯(CFDA),5(6)-Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester(CFDA),≥90% (HPLC)

产品编号：Sigma-21888| CAS NO：150347-59-4| MDL NO：MFCD00037466| 分子式：C29H19NO11| 分子量：557.46

CFSE 是一种可穿透细胞膜的荧光染料，其能与胞内细胞骨架蛋白中的游离胺基反应，最终形成具有荧光的蛋白复合物。该染料进入细胞后主要定位于细胞膜、细胞质和细胞核，在细胞核的染色效果最强。 CFSE 染料可用于检测细胞增殖，CFSE 可随着细胞的分裂增殖而被子代细胞均匀继承，其含量的衰减与细胞分裂次数成正比，该荧光信号可在 488 nm 的激发光下进行检测，并可通过流式细胞仪进行分析。

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产品名称

5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯(CFDA)

英文名称

5(6)-Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester(CFDA),≥90% (HPLC)

CAS编号

150347-59-4

产品描述

产品熔点

152-154ºC(lit.)

产品沸点

757.9±70.0 °C at 760 mmHg

产品密度

1.6±0.1 g/cm3

产品闪点

412.2±35.7 °C

精确质量

557.095825

PSA

151.81000

LogP

0.50

蒸气压

0.0±2.6 mmHg at 25°C

折射率

1.701

溶解性数据

In Vitro:

DMSO : 50 mg/mL (89.69 mM; Need ultrasonic)

配制储备液

浓度溶剂体积质量	1 mg	5 mg	10 mg

1 mM	1.7939 mL	8.9693 mL	17.9385 mL
5 mM	0.3588 mL	1.7939 mL	3.5877 mL
10 mM	0.1794 mL	0.8969 mL	1.7939 mL

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。

In Vivo:

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：

——为保证实验结果的可靠性，澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶

1.

请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 40% PEG300 5% Tween-80 45% saline
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (3.73 mM); Clear solution

此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (3.73 mM，饱和度未知) 的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀；然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。
将 0.9 g 氯化钠，完全溶解于 100 mL ddH₂O 中，得到澄清透明的生理盐水溶液
2.

请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 90% corn oil
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (3.73 mM); Clear solution

此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (3.73 mM，饱和度未知) 的澄清溶液，此方案不适用于实验周期在半个月以上的实验。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。

*以上所有助溶剂都可在西域网站选购。

体外研究

CFSE工作液的配制
1.1 储备液的配制
取 1 mg CFSE溶于 0.1794 mL DMSO 中，得到 10 mM CFSE。
注：原液建议 -20℃ 或 -80℃ 避光保存，避免反复冻融。
1.2 CFSE 工作液的配制
在无血清细胞培养中稀释原液
注意：请根据实际情况调整CFSE工作液的浓度。
细胞染色
2.1 悬浮细胞：4℃，1000g 离心 3-5 分钟，弃上清。PBS 洗涤 2 次，每次 5 分钟。
贴壁细胞：弃去细胞培养基，加入胰蛋白酶解离细胞，制成单细胞悬液。4℃ 1000g 离心 3-5 分钟，弃上清。PBS 洗涤 2 次，每次 5 分钟。
2.2 加入 1 mL CFSE 工作液，室温孵育 30 分钟。
2.3 4℃，400 g 离心 3-4 分钟
2.4 PBS 洗涤 2 次，每次 5 分钟。
2.5 用无血清细胞培养基或 PBS 重悬细胞，荧光显微镜或流式细胞仪检测。

体内研究

琥珀酰亚胺酯(CFSE)是一种荧光细胞染料。CFSE具有细胞可透过性，通过其琥珀酰亚胺基团，与细胞内赖氨酸残基及其他胺来源共价结合。不仅用于细胞增殖的体外实验,也可用于追踪细胞在体内的分裂增殖过程。它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶催化分解成CFSE，CFSE可以偶发性地并不可逆地与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上。在细胞分裂增殖过程中，CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强度是亲代细胞的一半，用流式细胞仪或荧光显微镜在490 nm 激发光处可对其进行分析。CFDA, SE标记后的细胞用于体内观察可以长达数周。因此，CFDA, SE常被用来做活细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。CFDA, SE标记的细胞的激发的发射波长分别为500nm和520nm。

另一个参考的CAS号：150206-15-8

细胞实验

使用说明

1、CFSE 溶液的配制

1.1 制备储存液
用 DMSO 配制 10 mM 的 CFSE。CFSE 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 5-10 μM 的 CFSE 工作液。

注意：请根据实际情况调整 CFSE 工作液浓度，现配现用。

2、细胞染色

2.1 向细胞中加入 1 mL CFSE 工作液，室温孵育 15 分钟。
2.2 400 g，4℃ 离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.3 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.4 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，在荧光显微镜或流式细胞仪下检测。

动物实验

*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。

Concentration / Solvent Volume / Mass	1 mg	5 mg	10 mg
1 mM	1.7939 mL	8.9693 mL	17.9385 mL
5 mM	0.3588 mL	1.7939 mL	3.5877 mL
10 mM	0.1794 mL	0.8969 mL	1.7939 mL

不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表（参考来源于公开文献）

	小鼠	大鼠	兔	豚鼠	仓鼠	狗
重量 (kg)	0.02	0.15	1.8	0.4	0.08	10
体表面积 (m²)	0.007	0.025	0.15	0.05	0.02	0.5
K_m 系数	3	6	12	8	5	20

动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) ×	动物 B的K_m系数
	动物 A的K_m系数

例如，依据体表面积折算法，将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量，需要将20 mg/kg 乘以小鼠的K_m系数（3），再除以大鼠的K_m系数（6），得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。

稳定性

常温常压下稳定，避免与强氧化剂接触。

储存条件

密封储存，储存于阴凉、干燥的库房。

化学品安全说明书(MSDS)

下载MSDS

质检证书(COA)

个人防护装备	Eyeshields;Gloves;type N95 (US);type P1 (EN143) respirator filter
危险品运输编码	NONH for all modes of transport

1. 物质的识别

产品名：	CFSE (CFDA-SE)
CAS号：	150347-59-4
制造商/供应商：	西域试剂网站：www.hzbp.cn 邮件：13911702513@139.com

2. 合成/成分数据

产品名：	CFSE (CFDA-SE)
别名：	5(6)-CFDA N-succinmidyl ester
分子式：	C29H19NO11
分子量：	557.46

3. 急救措施

吸入后：	如果吸入，移至空气新鲜处，如果呼吸困难，给输氧，如呼吸停止，给予人工呼吸。
皮肤接触后：	用大量的水冲洗，移除污染的衣服和鞋子。
眼睛接触后：	检查并取下隐形眼镜，并用大量的水冲洗；呼叫医生。
吞食后：	如果吞食，用大量纯净水漱口；呼叫医生。

4. 消防措施

适当的灭火剂：	雾状水，二氧化碳，干粉或泡沫。
防护设备：	穿戴自给式呼吸器和防护服，以防止与皮肤和眼睛接触。

5. 泄漏应急处理

安全防范措施：	封锁泄漏区域；穿戴自给式呼吸器，防护服和厚橡胶手套。
清洁/收集措施：	使用液体粘合原料（硅藻土，通用粘合剂）吸取精细粉末；使用酒精擦洗表面和设备除去污渍；根据第11条处理被污染的材料。

6. 处理和储存

安全处理说明：	避免吸入和接触皮肤，眼睛及衣物；材料可能略微具有刺激性。
储存：	4°C, protect from light

7. 接触控制和个人防护

呼吸设备：	NIOSH / MSHA认可的呼吸器。
双手保护：	耐化学腐蚀的橡胶手套。
眼睛防护：	化学安全护目镜。

8. 稳定性和反应活性

稳定性：	按照说明存储是稳定的；避免强氧化剂。
热分解/其他要避免的情况：	避免光和热。

9. 毒性资料

急性毒性：	无可用资料。
主要刺激性影响：	无可用资料。
在皮肤上：	无可用资料。
对眼睛：	无可用资料；可能具有刺激性。

10. 生态资料

一般注意事项：

无可用资料。

11. 废弃处置

按照所在国家，省份，县市和地方的法规处置。

12. 运输信息

正确的运输名称：	无
非危险品运输：	这种物质被视为非危险品运输。

13. 法规信息

尚未有针对此产品作出的化学安全性评估。

14. 其他信息

[1]. Cinthia C. Stempin, et al. GRAIL and Otubain-1 are Related to T Cell Hyporesponsiveness during Trypanosoma cruzi Infection. PLoS Negl Trop Dis. 2017 Jan; 11(1): e0005307.

[2]. Xiuyun Jiang et al. Long-lived pancreatic ductal adenocarcinoma slice cultures enable precise study of the immune microenvironment. Oncoimmunology. 2017; 6(7): e1333210.