Bax

Caspase 3

Caspase 8

Caspase 9

Apoptosis

Autophagy

人参皂苷Rh4引起细胞色素C释放并激活死亡受体Fas，促凋亡蛋白Bax和半胱天冬酶3，半胱天冬酶8和半胱天冬酶9.人参皂苷Rh4通过Caco-2中的内在和外在途径诱导胱天蛋白酶依赖性细胞凋亡。 HCT-116细胞。 CCK-8测定表明，人参皂苷Rh4可以不同程度地显着抑制结肠直肠癌细胞（如Caco-2和HCT-116细胞）的生长。人参皂苷Rh4以浓度和时间依赖性方式显着降低细胞活力。特别地，在孵育48小时后，用120和180μM人参皂苷Rh4处理导致显着的Caco-2细胞死亡分别为44.51±1.23％和75.74±2.91％。在用120μM（33.62±1.98％）和180μM人参皂苷Rh4（59.88±2.31％）的浓度处理的HCT-116细胞中观察到类似的结果。相反，从120到300μM的Rh4浓度对正常人结肠上皮细胞系CCD-18Co没有明显的毒性作用，并且在24和48小时的处理之间观察到效果的轻微差异。在集落形成试验中，发现Caco-2和HCT-116细胞中的集落数显着减少，而CCD-18Co细胞中集落的数量几乎没有变化。

为了评估人参皂甙Rh4是否可以抑制结肠直肠癌的生长，通过用Caco-2细胞接种裸鼠来建立结肠直肠癌异种移植模型。用20和40mg / kg人参皂苷Rh4和40mg / kg CAMPTO处理的小鼠在处理30天后表现出比对照小的肿瘤，分别显示出29.91％，66.30％和77.82％的抑制率。然而，人参皂苷Rh4处理组和CAMPTO处理组之间的体重存在显着差异。 20和40 mg / kg人参皂苷Rh4处理组的体重（15.95±0.35 g和18.35±0.44 g）明显较高，而CAMPTO处理组的体重较低（10.85±0.28 g）。溶剂对照组（14.19±0.25 g）。

通过CCK-8测定法测量细胞活力。对于这些测定，将Caco-2，HCT116和CCD-18Co细胞以每孔1×10 4个细胞的密度接种到96孔板上并孵育过夜，然后用0.1％（体积/体积）DMSO作为载体处理或人参皂苷Rh4（60,120,180,240和300μM）24或48小时。随后，将细胞与10％（体积/体积）CCK-8溶液一起温育2小时。然后用酶标仪读取450nm处的吸光度。计算细胞活力。