钙元素是人体重要的组成部分，在人体中通常以钙元素的形式存在，大量存在于人体的骨骼与牙齿中，少量存在于血液和组织内。 西域 钙离子检测探针可对细胞内钙离子进行特异性识别，具有高灵敏性，对细胞毒性较低，增加 AM乙酰甲酯可以好的进入到细胞内，在被细胞内的酯酶剪切后滞留在细胞内与钙离子结合，产生较强荧光，另外，Mag-indo-1/AM与Mag-Fluo-4 AM在一定的浓度下 (通常是 5 mM) 可以对细胞内镁离子进行有效的识别。

1. Indo-1 AM 工作液的配制
1.1 制备储存液
用无水 DMSO 稀释 Indo-1 AM 去配制 10 mM 的储备液。
注：Indo-1 AM 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的 HBSS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 Indo-1 AM 工作液。
注：请根据实际情况调整 Indo-1 AM 工作液浓度，且现用现配。
2. 细胞染色(悬浮细胞)
2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×10⁶/mL。
2.2 加入 1 mL Indo-1 AM 工作液，室温孵育 5-30 分钟。
2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL HBSS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色(贴壁细胞)
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 5-30 分钟。
3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜进行观察。

1009.91

Solid

C₄₇H₅₁N₃O₂₂

112926-02-0

410

364

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

-20°C, protect from light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

• . Andrienko T, et al. Real-Time Fluorescence Measurements of ROS and [Ca2+] in Ischemic / Reperfused Rat Hearts: Detectable Increases Occur only after Mitochondrial Pore Opening and Are Attenuated by Ischemic Preconditioning. PLoS One. 2016 Dec 1;11(12):e01  [Content Brief]

  . Andrienko T, et al. Real-Time Fluorescence Measurements of ROS and [Ca2+] in Ischemic / Reperfused Rat Hearts: Detectable Increases Occur only after Mitochondrial Pore Opening and Are Attenuated by Ischemic Preconditioning. PLoS One. 2016 Dec 1;11(12):e0167300.  [Content Brief]

  . Blatter LA, et al. Intracellular diffusion, binding, and compartmentalization of the fluorescent calcium indicators indo-1 and fura-2. Biophys J. 1990 Dec;58(6):1491-9.  [Content Brief]