MET:0.74 nM (IC50)

测试了Ensartinib（X-396）抑制携带ALK融合或点突变的不同癌细胞系生长的能力。恩他替在含有EML4-ALK E13; A20（IC50：15nM）的H3122肺癌细胞中是有效的。恩他替在含有EML4-ALK E6a / b的H2228肺癌细胞中也有效; A20（IC50：45 nM）。此外，X-376在携带NPM-ALK的SUDHL-1淋巴瘤细胞中有效（IC50：9nM）。 X-376还抑制携带ALK F1174L的SY5Y神经母细胞瘤细胞，携带MET依赖的MKN-45胃癌细胞，携带EGFR外显子19 del的HepG2细胞和PC-9肺癌细胞系，IC50分别为68 nM，156 nM，9.644μM和2.989 μM，分别为。

研究了Ensartinib（X-396）在体内对H3122异种移植物的作用。药代动力学研究表明，Ensartinib在体内具有显着的生物利用度和适度的半衰期。携带H3122异种移植物的裸鼠用恩替丁尼以25mg / kg bid处理。与单独的载体相比，Ensartinib显着延迟了肿瘤的生长。在异种移植实验中，Ensartinib在体内表现出良好的耐受性。小鼠体重不受Ensartinib治疗的影响。药物治疗的小鼠看起来健康，并且没有显示任何化合物相关毒性的迹象。为了进一步评估恩他替尼的潜在副作用，在Sprague Dawley（SD）大鼠中进行了额外的全身毒性和毒理动力学研究。在SD大鼠中以20,40,80mg / kg重复口服恩他替尼10天后，所有动物存活至研究终止。恩他替尼的无显着毒性（NST）水平确定为80mg / kg。在NST水平，Ensartinib的AUC为66μM×hr，Cmax为7.19μM。

对于活力实验，将细胞以25％-33％汇合接种于96孔板中并暴露于药物。用Ensartinib（10,30,100,300和1000nM）处理人肺腺癌细胞系H3122和H2228。用Ensartinib（5,10,30,100和300nM）处理SUDHL-1淋巴瘤细胞。用Ensartinib（30,100,300和1000nM）处理SY5Y神经母细胞瘤细胞。在Ensartinib添加后72小时，加入Cell Titer Blue Reagent并在Spectramax分光光度计上测量荧光。所有实验点以一式六份重复建立，并且至少进行两次独立的时间。使用适用于Windows的GraphPad Prism版本5计算IC50。使用具有log（抑制剂）与响应公式的非线性回归模型拟合曲线。

小鼠裸鼠（nu / nu）注射H3122细胞。一旦肿瘤达到450mm 3的平均体积，将总共27只携带H3122肿瘤的无胸腺小鼠随机化并通过口服管饲法给予25mg / kg恩替替尼（X-396）或对照载体。在单次治疗后2小时，5小时和15小时（3个肿瘤/时间点/组），处死小鼠并收集血清用于使用基于LC-MS的生物分析方法评估药物浓度。