STAT3:0.25 μM (IC50, in HeLa cells)

氯硝柳胺一水合物是STAT3的抑制剂，抑制STAT3介导的荧光素酶报告基因活性，在HeLa细胞中IC50为0.25μM。氯硝柳胺（1μM）抑制EGF诱导的Du145细胞中STAT3的核转位。氯硝柳胺（<2μM）剂量依赖性地抑制Du145细胞中STAT3下游基因的转录。氯硝柳胺（<10μM）以剂量依赖的方式诱导Du145癌细胞的G0 / G1停滞和凋亡。氯硝柳胺可以在感染SARS-CoV的Vero E6细胞中以微摩尔浓度阻断SARS-CoV复制。氯硝柳胺（<7.5μM）促进Frizzled1内吞作用，下调Disheveled-2蛋白，并抑制Wnt3A刺激的U2OS细胞中β-catenin稳定和LEF / TCF报告基因活性。氯硝柳胺在U2OS细胞中以剂量和时间依赖性方式抑制TNF诱导的NF-κB报告基因活性。氯硝柳胺（125nM）抑制U2OS细胞中p65，IKKα，IKKβ，IKKγ和TAK1诱导的NF-κB活化。氯硝柳胺（<500nM）完全阻断时间和剂量依赖性TNFα诱导的HL-60细胞中NF-κB-DNA复合物的改变。氯硝柳胺（<10nM）抑制U266细胞中的组成型NF-κB活化。氯硝柳胺在HL-60，Molm13或AML原代细胞中以剂量和时间依赖性方式抑制TNF诱导的IκBα降解和p65的重新定位。氯硝柳胺（500nM）引起TNF诱导的NF-κB依赖性基因产物的减少，所述基因产物参与HL-60细胞中的细胞存活。氯硝柳胺还抑制生长并诱导与Mcl-1和XIAP水平降低以及细胞内ROS水平升高相关的AML细胞的强烈凋亡。

氯硝柳胺（40mg / kg / d，ip）抑制携带HL-60异种移植肿瘤的裸鼠中异种移植的AML细胞的生长。

将细胞接种于96孔培养板中，细胞密度为3-4×103细胞/孔，并在第二天通过加入100μL含有各种浓度的氯硝柳胺的培养基用氯硝柳胺处理。处理72小时后，向每个孔中加入MTT并再孵育4-5小时，并在酶标仪上在570nm处测量吸光度。将细胞生长抑制评估为样品的吸光度与对照的吸光度之比。结果代表至少3次独立实验。

雄性nu / nu BALB / c小鼠在中山大学的动物设施中繁殖。将HL-60细胞皮下接种在4至6周龄小鼠的侧腹上。每隔一天使用卡尺测量肿瘤。将携带HL-60异种移植物的小鼠随机化以接受用生理盐水（对照）或对氯硝柳胺处理15天（每组n = 7只动物）。肿瘤体积通过下式计算：a2×b×0.4，其中a是最小直径，b是垂直于a的直径。在小鼠实施安乐死后，解剖，称重或保存异种移植物。