Kd: 1.6±0.7 nM (Flt3)

Quizartinib（AC220）是一种新型化合物，明确优化为FLT3抑制剂，用于治疗急性髓性白血病（AML）。 Quizartinib抑制FLT3-WT和FLT3-ITD自身磷酸化，IC50分别为4.2±0.3 nM和1.1±0.1 nM。 Quizartinib抑制MV4-11和A375细胞，IC50分别为0.56±0.3 nM和> 10000 nM。 Quizartinib在细胞试验中以低纳摩尔效力抑制FLT3，并且在筛选大多数人蛋白激酶组时具有高选择性。

Quizartinib（AC220）在体内抑制FLT3活性，每天口服一次，以低至1 mg / kg的剂量显着延长FLT3-ITD AML小鼠模型的存活率，在FLT3依赖的小鼠异种移植模型中消除肿瘤10 mg / kg，并有效抑制原发性患者细胞中的FLT3活性。通过比较3mg / kg的口服和静脉内药代动力学在大鼠中测定的Quizartinib的口服生物利用度为约40％。通过口服强饲法施用单次10mg / kg剂量的Quizartinib，并且在给药后2个时间点处死小鼠，每组使用4只动物。肿瘤样品中总FLT3和磷酸-FLT3的定量揭示了FLT3自身磷酸化的时间依赖性抑制。 FLT3活性在2小时时抑制90％，在给药后24小时抑制40％。因此，基于药代动力学实验，抑制程度与预期的游离Quizartinib血浆水平相关。

MV4-11和RS4; 11细胞分别在含有10％胎牛血清（FBS）的Iscove培养基和10％FBS的RPMI培养基中培养。对于增殖测定，将细胞在低血清培养基（0.5％FBS）中培养过夜，然后以每孔40000个细胞接种于96孔板中。将抑制剂（例如，Quizartinib）加入细胞中并在37℃下孵育72小时。使用Cell Titer-Blue Cell Viability Assay测量细胞活力。为了测量对FLT3自磷酸化的抑制，将细胞在低血清培养基（0.5％FBS）中培养过夜，并在第二天以9600孔板中的每孔400000个细胞的密度接种。将细胞与抑制剂（例如，Quizartinib）在37℃下孵育2小时。为了在RS4; 11细胞中诱导FLT3自磷酸化，在2小时化合物孵育后加入100ng / mL FLT3配体15分钟。制备细胞裂解物并在预涂有总FLT3捕获抗体的96孔板中温育。将包被的平板与针对FLT3的生物素化抗体一起温育以检测总FLT3或针对磷酸酪氨酸的抗体以检测FLT3自身磷酸化。在两种情况下，SULFO标记的链霉抗生物素蛋白二抗用于Meso Scale Discovery平台上的电化学发光检测。

*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。

不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表（参考来源于公开文献）

例如，依据体表面积折算法，将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量，需要将20 mg/kg 乘以小鼠的K_m系数（3），再除以大鼠的K_m系数（6），得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。