使用方法
1.Calcein AM 工作液的配制
用 DMSO 配置 5 mM 储备液，再用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 Calcein AM 工作液。
注：请根据实际情况调整 Calcein AM 工作液浓度，且现用现配。
2. 细胞染色（悬浮细胞）
2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×10⁶/mL。
2.2 加入 1 mL Calcein AM 工作液，37℃ 孵育 30-45 分钟。
2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色（贴壁细胞）
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，37℃ 孵育 30-45 分钟。
3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜或荧光酶标检测仪进行观察。

保存条件
-20℃ 避光保存

注意事项
1. 请根据实际情况调整 Calcein AM 工作液浓度与孵育时间。
2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

钙黄绿素-AM被发现适用于体内研究，因为它对细胞功能没有有害影响，实际上是细胞活力的标志。

K562，Daudi和Chang肝细胞用钙黄绿素-AM标记。 Calcein-AM的激发和发射波长分别为496nm和520nm。用于检测钙黄绿素-AM绿色荧光的滤光片/镜组合包括490nm激发和带有二向色镜的520nm发射滤光片。测试孔和对照孔之间的自动荧光读数的差异决定了结果。使用钙黄绿素-AM建立简单且灵敏的细胞 - 细胞粘附微板测定。该过程包括三个步骤：在短暂的孵育期（30分钟）内用足够浓度的钙黄绿素-AM（20μM）标记淋巴细胞;每孔2×105标记的淋巴细胞与微量滴定板中生长的融合角质形成细胞或成纤维细胞单层粘附90分钟;最后，利用新的冷光微荧光测量系统测量荧光信号。将细胞在含有0.05％叠氮化钠的PBS缓冲液（pH7.4）中的1mL 1％皂苷溶液中温育15分钟。在皂苷透化后，将含有0.1％皂苷和0.05％叠氮化钠的PBS缓冲液中的4×105RBC悬浮液（37℃，黑暗中45分钟）与钙黄绿素-AM孵育至终浓度为5μM，洗涤三次用含有0.1％皂苷和0.05％叠氮化钠的相同PBS缓冲液，通过流式细胞术分析细胞活力。

*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。

不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表（参考来源于公开文献）

例如，依据体表面积折算法，将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量，需要将20 mg/kg 乘以小鼠的K_m系数（3），再除以大鼠的K_m系数（6），得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。

储存条件:    -20°C       

运输方式:    冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。