Human COX-2:85 nM (IC50)

研究了新型选择性环氧合酶（COX）-2抑制剂JTE522（JTE-522）对人COX-1和COX-2的抑制活性和作用机制，并与参考化合物进行了比较。在酶测定中，JTE522抑制酵母表达的人重组COX-2，IC50为0.085μM。相反，JTE522不抑制浓度高达100μM的人血小板制备的人COX-1。在基于细胞的测定中，JTE522减少人外周血单核细胞（COX-2）中脂多糖诱导的前列腺素E2产生（IC50 = 15.1nM）。另一方面，JTE522在洗涤的人血小板（COX-1）中抑制钙离子载体诱导的血栓素B2产生的效力较低（IC50 =6.21μM）。 JTE522显示出对人COX-2的高选择性抑制，并且其活性比其他COX-2抑制剂（NS-398和SC-58635）更具选择性。人重组COX-2活性被JTE522以剂量依赖性和时间依赖性方式减弱。环氧合酶2抑制剂JTE522对胃上皮细胞增殖的抑制也是由PGE2非依赖性途径介导的。与对照相比，JTE522和花生四烯酸的组合导致伤口愈合明显延迟，但JTE522并未完全抑制添加花生四烯酸后细胞PGE2含量增加。

本实验旨在评估JTE522（JTE-522）（一种新的选择性环氧合酶-2抑制剂）对诱导1,2-二甲基肼（DMH）诱导的结肠异常隐窝病灶（ACF）的潜在化学预防性能。大鼠结肠癌发生的标志物。从实验开始每周五次，通过口服管饲法给总共80只雄性F344大鼠用3或10mg / kg体重的JTE522或媒介物治疗。一周后，大鼠每周一次接受sc注射生理盐水或20mg / kg体重DMH，连续四周。在实验开始后12周结束时，处死所有大鼠并评估结肠的ACF。 10mg / kg JTE522显着抑制总ACF /结肠。在3mg / kg JTE522处理组中未观察到抑制作用。施用10mg / kg JTE522显着抑制ACF形成，总ACF /结肠减少30％（p <0.01）。此外，关于隐窝多样性的数据显示，10mg / kg JTE522显着减少了含有1-3个隐窝的病灶的形成，但没有显示含有4个隐窝或更多隐窝的病灶。施用低剂量的JTE522（3mg / kg）对总ACF或隐窝多样性没有抑制作用。

在实验之前用DMSO拆分JTE522并评估1-100μM的浓度。在0,5和20μg/ mL的浓度下评估花生四烯酸的作用。此外，在另外的实验中评估JTE522（100μM）与花生四烯酸（20μg/ mL）的组合。在形成完整的单层细胞片后产生圆形人造伤口。在伤口形成后立即加入JTE522和花生四烯酸。通过每24小时使用倒置相差显微镜测量无细胞区域来监测上皮恢复过程。使用图像分析仪定量分析恢复期间无细胞区域的变化。

大鼠使用总共80只雄性F344大鼠，5周龄。将1周适应后6周龄的大鼠随机分成5组。从实验开始后1周，每组一次，连续四周，给组1-3中的大鼠（每组20只大鼠）皮下注射DMH（20mg / kg体重）。第4组和第5组（每组10只大鼠）同时用0.9％盐水皮下注射。组2通过口服强饲法以3mg / kg体重的剂量用JTE522处理，从实验开始到实验结束每周五次。第3组和第5组用JTE522以10mg / kg体重的剂量以与组2相同的方式处理。组1和4用单独的0.5％CMC处理，不用JTE522处理。在实验期间每周测量体重，水和食物消耗。