MitoTracker Green FM 工作液的配制

1.1 制备储存液

用 DMSO 配制 1 mM 的 MitoTracker Green FM。如用 74.4 μL DMSO 溶解 50 μg MitoTracker Green FM。

注：MitoTracker Green FM 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。

1.2 工作液的配制

用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 按照 1:5000-1:50000 稀释储存液，配制成 20-200 nM 的 MitoTracker Green FM 工作液。

注：请根据实际情况调整 MitoTracker Green FM 工作液浓度，且现用现配。

2. 细胞染色（悬浮细胞）

2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×106/mL。

2.2 加入 1 mL MitoTracker Green FM 工作液，室温孵育 15-45 分钟。

2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。

2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。

2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

3. 细胞染色（贴壁细胞）

3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。

3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 15-45 分钟。

3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟 ，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

注意事项

1. MitoTracker Green FM 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存，避免反复冻融。-20℃ 可保存 1 个月，-80℃ 可保存半年。

2. 请根据实际情况调整 MitoTracker Green FM 工作液浓度。

3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

MitoTracker Green FM是一种细胞渗透型的carbocyanine结构衍生物，包含标记线粒体的弱巯基反应性的氯甲基官能团。本品是一种亮绿色荧光探针（（Ex=490 nm，Em=516 nm）），其在水溶液中几乎不发荧光，只有当聚集在线粒体的脂质环境才能发荧光，背景荧光几乎可忽略。本品经乙醛固定后染料不稳定，因此更适合活细胞染色。

储备液配制

*下述溶液配置方法仅为基于分子量计算出的理论值。不同产品在配置溶液前，需考虑其在不同溶剂中的溶解度限制。

不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表（参考来源于公开文献）

例如，依据体表面积折算法，将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量，需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数（3），再除以大鼠的Km系数（6），得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。

储存条件:    2-8°C       

运输方式:    冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。